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解析滨松MAICO共聚焦模块的分辨率特性

2024-07-22

浏览量(103)

众所周知,共聚焦显微镜通过针孔设计有效过滤焦平面以外的光,显著提升了对比度和分辨率。针对用户常问的“滨松共聚焦模块MAICO分辨率是多少?”的问题,本文将进行详细解答。

1.      MAICO分辨率概述

 

由于分辨率是由整个光学系统决定的,而MAICO模块本身不带光路,因此没有单独的分辨率概念。其分辨率需结合物镜和放大倍率来考虑。

 

等效像素尺寸说明

有些客户可能实际关心的是等效像素尺寸,MAICO的等效像素尺寸为6.25 μm。

 

分辨率公式:宽场显微镜VS共聚焦显微镜

滨松共聚焦模块MAICO的XY方向分辨率最大可达到120-200 nm之间,Z轴可达到250-400 nm(以100× NA1.5为例),具体数值依激光波长不同而有所变化。

 

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显然,共聚焦显微镜分辨率显著高于宽场显微镜。

*有需要详细分辨率数据的客户可以下载滨松推出的MAICO Resolution Simulator方便地进行查询各种条件下MAICO可以达到的分辨率。扫码下载。

 

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或者复制如下链接进入下载页面:https://www.hamamatsu.com/jp/en/product/life-science-and-medical-systems/mems-confocal-unit/resolution-simulator.html

在输入物镜规格和激光通道后,就可以得出三种针孔对应的AU以及XY-Z方向的分辨率。

 

2.      针孔尺寸与图像质量的平衡

 

为了达到最佳的分辨率,理论上针孔尺寸应当越小越好,不过为了在分辨率和图像灵敏度两者之间取得平衡,可以适当地设置针孔尺寸以达到最合适的图像质量。

 

针孔尺寸的选择

MAICO为每个通道设置了三档可选的针孔尺寸:S(小)、M(中)、L(大)。

弱荧光样品:推荐使用L(大)针孔,以提高图像信噪比。

强荧光样品:推荐使用M(中)或者S(小)针孔,以获得更高的分辨率。

 

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物镜选择建议

由于光学设计方面限制的原因,我们推荐使用20-100倍的物镜,且物镜NA与放大倍率m满足如下关系:

 

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其中,NA为数值孔径,m为放大倍率。

通过合理配置物镜、放大倍率和针孔尺寸,滨松共聚焦模块MAICO能够提供卓越的分辨率和图像质量,满足各种科研和应用的需求。利用MAICO Resolution Simulator工具,用户可以轻松查询并优化其共聚焦系统的分辨率。

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